مطالعه اعتبار سنجی در مورد طول عمر تمیز کردن کاست های اولترافیلتراسیون

مطالعه اعتبار سنجی در مورد طول عمر تمیز کردن کاست های اولترافیلتراسیون

«تأیید اعتبار مادام‌العمر کاست‌های اولترافیلتراسیون (UF)» یک حوزه تمرکز کلیدی و فعالیت اعتبارسنجی در تولید بیودارویی است. هدف اصلی آن تعیین این است که آیا کاست می تواند عملکرد مورد انتظار خود و الزامات کیفیت محصول را پس از چندین دوره استفاده و تمیز کردن حفظ کند یا خیر.

برای اعتبار سنجی تمیز کردن و اعتبار سنجی مادام العمر کاست های اولترافیلتراسیون، هم FDA ایالات متحده و هم اداره ملی محصولات پزشکی چین (NMPA) الزامات نظارتی سختگیرانه ای دارند. آژانس‌های نظارتی در کشورهای مختلف انتظارات انطباق واضحی را در مورد مطالعات طول عمر کاست (از جمله طول عمر تمیز کردن و طول عمر عملیاتی) ارائه می‌کنند. اگرچه این عبارت ممکن است در بین مقامات نظارتی GMP در سراسر جهان متفاوت باشد، نگرانی آنها بسیار سازگار است- بر روی اینکه آیا استفاده مکرر از تجهیزات خطر بالقوه ای برای کیفیت محصول ایجاد می کند یا خیر.

هدف تمیز کردن کاست های اولترافیلتراسیون ایجاد یک فرآیند تکرارپذیر و قوی است. اهمیت آن در حذف آلاینده ها و جلوگیری از آلودگی متقابل، حفظ شار و بازده، و جلوگیری از آلودگی میکروبیولوژیکی است. از طریق این اقدامات، تمیز کردن کاست به تضمین کیفیت محصول و عملکرد فرآیند کمک می کند و در عین حال طول عمر کاست را به حداکثر می رساند.

برای انجام تمیز کردن کاست موثر، باید یک رویکرد سیستماتیک چهار مرحله‌ای دنبال شود:

یک روش تمیز کردن علمی درست کنید.

یک پروتکل تمیز کردن دقیق و روش عملکرد استاندارد بر اساس روش ایجاد کنید.

امکان سنجی و تکرارپذیری پروتکل و روش را از طریق فعالیت های اعتبارسنجی تأیید کنید.

به طور مداوم پروتکل تایید شده را در تولید پیاده سازی کنید، در حالی که پارامترهای حیاتی را پایش و ارزیابی کنید تا اطمینان حاصل شود که فرآیند تمیز کردن تحت کنترل باقی می ماند.

فرآیند تمیز کردن استاندارد برای کاست های TFF را می توان به صورت زیر خلاصه کرد:
شستشو بافر ← شستشو با آب ← درمان با عامل تمیز کننده ← شستشو با آب.

در تمیز کردن تجهیزات فرآیندهای زیستی، متداول‌ترین مواد پاک‌کننده شامل هیدروکسید سدیم (NaOH)، هیپوکلریت سدیم (NaClO) و اسیدها (مانند اسید فسفریک، اسید نیتریک و اسید کلریدریک) است.

هیدروکسید سدیم (NaOH) در 0.1-0.5 N، 30-50 درجه، به مدت 30-60 دقیقه، به طور موثر پروتئین ها را هیدرولیز می کند و لیپیدها را صابونی می کند، اما روی پلی ساکاریدها و بقایای سلولی کمتر موثر است. اثر تمیز کنندگی آن را می توان به راحتی با نظارت بر pH تأیید کرد.

هیپوکلریت سدیم (NaClO) در pH 9-10، کلر آزاد 250-500 ppm یا 0.1 N، 30-50 درجه، برای مدت زمان مشابه، می تواند تقریباً تمام ترکیبات آلی و بقایای سلولی را اکسید کند. اثربخشی تمیز کردن را می توان با استفاده از روش های رنگ سنجی یا روش های مشابه تأیید کرد.

پاک کننده های اسید در 0.1 نیوتن، 30 تا 50 درجه، به مدت 30 تا 60 دقیقه، عمدتاً برای هیدرولیز اسیدهای نوکلئیک و حل کردن نمک های معدنی استفاده می شوند. بقایای بیولوژیکی باید قبل از تمیز کردن اسید حذف شوند. اثربخشی آنها را می توان به راحتی با اندازه گیری pH تأیید کرد.

با توجه به الزامات ارزیابی پاکسازی پست{0}}، نفوذپذیری آب نرمال شده (NWP) غشا یا سیستم باید قبل و بعد از استفاده مقایسه شود. اگر NWP پس از استفاده بیش از20%در مقایسه با NWP اولیه (یعنی بازیابی در زیر است80%، در حالی که هدف باید باشدبیشتر از 90%، تمیز کردن اضافی باید در نظر گرفته شود. اقدامات ممکن است شامل افزایش غلظت ماده تمیزکننده، افزایش مدت زمان تمیز کردن، افزایش دمای تمیز کردن، یا جایگزینی محلول تمیزکننده باشد.

پس از تمیز کردن، نمونه‌ها باید از هر دو طرف احتباس شده و نفوذی جمع‌آوری شوند و برای پارامترهای متعدد از جمله آزمایش شوند.کربن آلی کل (TOC), اندوتوکسین, محدودیت های میکروبی, پروتئین کل, باقیمانده محصول (ELISA), تجزیه و تحلیل HPLC، و همچنینرساناییوpH. این تست ها ارزیابی جامعی از اثربخشی تمیز کردن و وضعیت سیستم ارائه می دهند. TOC و NWP از موثرترین ابزارها برای ارزیابی عملکرد تمیز کردن هستند.

نمونه ای از پارامترهای نظارت و معیارهای پذیرش برای اعتبارسنجی پاکسازی کاست TFF و ارزیابی اثربخشی تمیز کردن معمولی

برای برآورده کردن الزامات نظارتی و اطمینان از عملکرد پایدار کاست‌های TFF در فرآیندهای واقعی، شرکت‌ها باید یک سیستم مستندسازی مناسب ایجاد کنند و یک برنامه اعتبارسنجی طول عمر علمی و قابل اجرا توسعه دهند.

سیستم اسناد و مدارک:

پروتکل مطالعه مادام العمر کاست:شامل طراحی مطالعه، حداکثر تعداد استفاده و معیارهای ارزیابی مرتبط است.

پاک کردن-سوابق شبیه‌سازی چرخه:داده های شار و عملکرد واقعی جمع آوری شده از چرخه های تمیز کردن مکرر.

گزارش اعتبارسنجی پاکسازی:نتایج TOC، رسانایی، مواد تمیزکننده باقیمانده و سایر آزمایش‌های مرتبط.

گزارش مطالعه سازگاری مواد:پایداری مواد کاست در شرایطی مانند قرار گرفتن در معرض NaOH، دماهای بالا و غیره.

گزارش استفاده:سوابق قابل ردیابی استفاده از کاست، از جمله تعداد چرخه ها.

ضوابط بازنشستگی:آستانه عملکرد به وضوح تعریف شده است که در آن کاست باید از رده خارج شود.

برنامه اعتبار سنجی مادام العمر:

حداکثر تعداد چرخه استفاده را تعریف کنید، معمولاً بر اساس الزامات فرآیند یا توصیه های تأمین کننده تعیین می شود و با برآورد محافظه کارانه و داده های اعتبارسنجی کافی پشتیبانی می شود.

فرآیند تمیز کردن را مشخص کنیداز جمله نوع و غلظت مواد تمیز کننده، دما و مدت تمیز کردن، ترتیب تمیز کردن و مراحل آبکشی و همچنین فاصله بین چرخه های تمیز کردن.

پارامترهای کلیدی نظارت بر عملکرد را تعیین کنیدمانند نفوذپذیری آب نرمال شده (NWP)، نرخ حفظ پروتئین، فشار غشایی (TMP)، آزمایش یکپارچگی، و باقیمانده میکروبی/اندوتوکسین.

به طور مداوم سازگاری شیمیایی را ارزیابی کنید، نظارت بر مواد کاست برای علائم تخریب. تکنیک هایی مانند FTIR یا SEM ممکن است برای ارزیابی تغییرات مواد، همراه با ارزیابی مواد قابل استخراج و شسته شونده در صورت لزوم استفاده شود.

اعتبار سنجی باقی مانده هااز جمله آزمایش شستشوی نهایی برای pH، رسانایی و کربن آلی کل (TOC) برای اطمینان از حذف کامل مواد پاک کننده، و همچنین انجام آزمایش میکروبی و اندوتوکسین.

شاخص های کلیدی برای اعتبارسنجی طول عمر کاست اولترافیلتراسیون: