کروماتوگرافی غشایی آنیون قوی Q

 

2. مزایای محصول

2.1 سریع و کارآمد - ظرفیت اتصال بالایی را با سرعت جریان تا 40 برابر سریع‌تر از رزین‌های سنتی به دست می‌آورد. در مقایسه با کروماتوگرافی بستر بسته، زمان فرآیند با استفاده از کروماتوگرافی غشایی 30 تا 40 برابر کاهش می یابد. نرخ جریان عملیاتی معمولی 10 MV/min است.

2.2 کروماتوگرافی غشایی با کارایی بالا - ظرفیت بارگذاری بالا و نرخ جریان بالا را تحت شرایط افت فشار کم نشان می‌دهد و به بیومولکول‌های باردار اجازه می‌دهد که در یک پاس گرفته شوند.

2.3 مقیاس پذیر و انعطاف پذیر - سری کامل محصولات کروماتوگرافی غشایی می تواند نیازهای متنوع تصفیه بیوماکرومولکول را برآورده کند و همه مراحل از توسعه فرآیند تا تولید-در مقیاس بزرگ را پوشش دهد. طراحی ساختاری{4}}از نوع کپسول هم از عملکرد یکبار-و هم استفاده مجدد پس از تمیز کردن پشتیبانی می‌کند.

2.4 بهبود بهره وری - طراحی جمع و جور ردپای تسهیلات را به حداقل می رساند. با حذف عملیات بسته بندی ستون، تمیز کردن، اعتبار سنجی تمیز کردن و ذخیره سازی ستون، این فرآیند به بافر کمتری برای تعادل نیاز دارد و می تواند مستقیماً بدون آماده سازی ستون انجام شود. هزینه های نیروی کار را می توان تا 50 درصد کاهش داد.

 

3. پارامتر فنی

3.1 مصالح سازه ای

	مقیاس آزمایشگاهی	مقیاس کوچک	مقیاس آزمایشی	مقیاس تولید
حجم غشا	0.2 میلی لیتر	5 میلی لیتر	140 میلی لیتر	5L
ساختار پشتیبانی غشاء:	پلی پروپیلن (PP)
محفظه غشایی	پلی پروپیلن (PP)
ای حلقه	سیلیکون

 

3.2 ویژگی های عملیاتی

	مقیاس آزمایشگاهی	مقیاس کوچک	مقیاس آزمایشی	مقیاس تولید
حجم غشا	0.2 میلی لیتر	5 میلی لیتر	400 میلی لیتر	5L
نرخ جریان توصیه شده	1-6 میلی لیتر در دقیقه	25-150 میلی لیتر در دقیقه	2-12 لیتر در دقیقه	25-150 لیتر در دقیقه
حداکثر دمای عملیاتی	35 درجه
حداکثر فشار کاری	3bar (25 درجه)
حداکثر اختلاف فشار	3bar (25 درجه)
شرایط نگهداری:	محلول آبی اتانول 20 درصد

 

عمر مفید کروماتوگرافی غشایی Q با کروماتوگرافی ژل آگارز قابل مقایسه است.

 

 

شکل 1. تغییرات در ظرفیت بارگذاری کروماتوگرافی غشایی پس از استفاده های متعدد که توسط BSA نظارت می شود

علاوه بر این، ما کارایی حذف کروماتوگرافی غشایی را برای پروتئین‌های سلول میزبان و اسیدهای نوکلئیک ارزیابی کردیم. نتایج به شرح زیر است.

	DNA				HCP
	بازیابی IgG	محتوای (pg/mg IgG) توسط RT PCR		فاکتور حذف	محتوای (ng/mg IgG) توسط Elisa		فاکتور حذف
اجرا کنید	%	قبل از غشاء کیو	بعد از ممبران Q	ورود به سیستم	قبل از غشاء کیو	بعد از ممبران Q	ورود به سیستم
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

جدول 1. نرخ حذف DNA و پروتئین های سلول میزبان در CHO{1}}مواد IgG بیان شده با استفاده از کروماتوگرافی غشایی Q

 

مجموعه ای از آزمایشات نشان داد که کروماتوگرافی غشایی Q می تواند به طور موثر ناخالصی ها را حذف کند در حالی که بازیابی IgG هدف بالا را حفظ می کند.

علاوه بر این، کروماتوگرافی غشایی Gudiling را با مارک های وارداتی مقایسه کردیم و داده های ظرفیت بارگذاری به شرح زیر است:

ظرفیت بارگیری (mg/ml)	سارتوریوس	رنگ پریدگی	هدایت کردن
BSA	29	60	45
SOD	25	40	35
پروتئین A	27	45	40
تریپسین	30	56	44

جدول 2. عملکرد بارگیری پروتئین های مختلف بر روی محصول و محصولات رقیب ما

ارزیابی کلی نشان می دهد که ظرفیت بارگیری ما با محصولات وارداتی قابل مقایسه است.

شکل 2.با استفاده از یک ماژول کروماتوگرافی غشایی Q، BSA به عنوان پروتئین استاندارد برای ارزیابی ظرفیت اتصال استفاده شد. ظرفیت اتصال پویا با محصولات وارداتی مقایسه شد. نتایج نشان داد که بیشتر پروتئین هدف را می توان گرفت و با آن شستشو داد150 میلی مولار NaClهنگام استفاده از BSA به عنوان پروتئین مدل.

از طریق شرایط شستشوی مختلف، متوجه شدیم که رفتار شستشوی کروماتوگرافی غشایی شبیه به کروماتوگرافی ژل آگارز است. خلوص پروتئین های شسته شده در غلظت های مختلف نمک به طور قابل توجهی متفاوت است. در توسعه و تولید فرآیند واقعی، تعیین کمی شرایط بهینه شستشو برای به دست آوردن پروتئین هدف با خلوص بالا ضروری است.

 

4. مورد کاربردی معمولی

حذف DNA، ویروس ها، پروتئین های سلول میزبان (HCP) و اندوتوکسین ها

جذب پلاسمیدها، ویروس ها و پروتئین ها و همچنین خالص سازی الیگونوکلئوتیدها

 

5. رویه عملیاتی

5.1: آماده سازی و مونتاژ تجهیزات:

5.1.1: سیستم کروماتوگرافی AKTA: ماژول کروماتوگرافی غشایی را به روشی شبیه به ستون های بسته شده نصب کنید. اطمینان حاصل کنید که جهت پیکان روی ماژول با جهت جریان تغذیه مطابقت دارد. سیستم را با استفاده از اتصالات Luer یا اتصالات Tri{3}}کلمپ وصل کنید.

5.1.2 دبی ورودی را روی 5-10 MV/min تنظیم کنید و از بافر تعادل برای حذف هوا از سیستم استفاده کنید. پس از اطمینان از عدم وجود حباب هوا در جریان خروجی، خروجی تراوش را به سیستم کروماتوگرافی وصل کنید.

5.2: درمان قبل از-استفاده:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV برای اطمینان از رسیدن غشا به تعادل.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV برای اطمینان از رسیدن غشا به تعادل.

5.3 فرآیند کروماتوگرافی

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV تا زمانی که غشا به تعادل برسد.

5.3.2 پس از اینکه نمونه از قبل از طریق فیلتر 0.22 میکرومتر فیلتر شد، آن را روی ستون قرار دهید تا کل نمونه اعمال شود یا ظرفیت اتصال کروماتوگرافی به دست آید.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV تا زمانی که سیگنال UV به خط پایه کاهش یابد.

5.3.4 شستشوی گرادیان یا خطی را طبق پروتکل طراحی شده انجام دهید و در صورت نیاز کسری را جمع آوری کنید.

5.4 پست CIP{1}}استفاده از درمان - دستگاه کروماتوگرافی غشایی CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV تا زمانی که سیگنال UV به زیر خط پایه کاهش یابد.

5.4.2 پس از گردش به مدت 30 دقیقه، به شستشو با آب بروید تا PH به 7-8 برسد، سپس به اتانول 20 درصد تغییر دهید و شستشو را تا تثبیت رسانایی ادامه دهید.

5.5، ذخیره سازی کروماتوگرافی غشایی:

پس از استفاده و تکمیل CIP، ماژول غشاء را می توان جدا کرد و در اتانول 20٪ ذخیره کرد، یا در دمای اتاق در اتانول 20٪ به صورت آنلاین نگهداری کرد. محلول اتانول باید به صورت دوره ای تعویض و بازرسی شود.

 

6. اطلاعات سفارش

Q Strong Anion{0}}فیلتر کپسول کروماتوگرافی غشایی تبادلی

	مقیاس آزمایشگاهی	مقیاس کوچک	مقیاس آزمایشی	مقیاس تولید
مدل محصول	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
حجم غشا	0.2 میلی لیتر	5 میلی لیتر	400 میلی لیتر	5L

تگ های محبوب: q کروماتوگرافی غشایی آنیون قوی، چین، تامین کنندگان، تولید کنندگان، کارخانه، عمده فروشی، عمده، در انبار، نمونه رایگان