CM یون ضعیف-کروماتوگرافی غشایی تبادلی

معرفی محصول کروماتوگرافی غشایی تبادل کاتیونی قوی SP 

 

2. مزایای محصول

سریع و کارآمد ظرفیت اتصال بالا را می توان با سرعت جریان تا 40 برابر سریعتر از کروماتوگرافی رزینی سنتی به دست آورد. در مقایسه با کروماتوگرافی مبتنی بر رزین مرسوم، زمان فرآیند با استفاده از کروماتوگرافی غشایی را می توان 30 تا 40 برابر کاهش داد. نرخ جریان عملیاتی معمولی حدود 10 MV/min است.

2.2 کروماتوگرافی غشایی با راندمان اتصال بالا ظرفیت اتصال بالا و نرخ جریان بالا را در افت فشار کم نشان می‌دهد و به مولکول‌های زیستی باردار می‌تواند در یک عبور از ماژول جذب شود.

2.3 مقیاس پذیر و انعطاف پذیر طیف کاملی از محصولات کروماتوگرافی غشایی می تواند نیازهای مختلف تصفیه زیست مولکول را برآورده کند و برنامه های کاربردی از توسعه فرآیند تا تولید{1} در مقیاس بزرگ را پوشش دهد. طراحی کپسول امکان عملکرد یکبار- را فراهم می‌کند یا می‌تواند پس از انجام مراحل تمیز کردن مناسب تمیز و مجدداً استفاده شود.

2.4 بهره وری بهبود یافته طراحی جمع و جور ردپای تسهیلات را به حداقل می رساند. با حذف عملیاتی مانند بسته بندی ستون، تمیز کردن، اعتبارسنجی تمیز کردن و ذخیره سازی ستون، پردازش می تواند پس از تعادل ساده با بافر نسبتاً کمتر آغاز شود. از آنجایی که نیازی به بسته بندی ستون، تمیز کردن یا ذخیره سازی نیست، هزینه های نیروی کار را می توان بیش از 50٪ کاهش داد.

 

 

3 پارامترهای فنی

3.1 مصالح سازه ای

	مقیاس آزمایشگاهی	مقیاس کوچک	مقیاس آزمایشی	مقیاس تولید
حجم غشا	0.2 میلی لیتر	5 میلی لیتر	140 میلی لیتر	5L
ساختار پشتیبانی غشایی	پلی پروپیلن
محفظه غشایی	پلی پروپیلن
ای حلقه	سیلیکون

3.2 ویژگی های عملیاتی

	مقیاس آزمایشگاهی	مقیاس کوچک	مقیاس آزمایشی	مقیاس تولید
حجم غشا	0.2 میلی لیتر	5 میلی لیتر	400 میلی لیتر	5L
نرخ جریان توصیه شده	1-6 میلی لیتر در دقیقه	25-150 میلی لیتر در دقیقه	2-12 لیتر در دقیقه	25-150 لیتر در دقیقه
حداکثر دمای عملیاتی	35 درجه
حداکثر فشار کاری	3bar (25 درجه)
حداکثر اختلاف فشار	3bar (25 درجه)
شرایط نگهداری	20% eتانولaبی قرارsراه حل

مقایسه نشان می دهد که طول عمر کروماتوگرافی غشایی SP با SP Sepharose 6FF قابل مقایسه است.

شکل 1. تغییرات ظرفیت اتصال کروماتوگرافی غشایی SP پس از چندین بار آزمایش با لیزوزیم

علاوه بر این، ما کروماتوگرافی غشایی را برای کارایی آن در حذف پروتئین‌های سلول میزبان و اسیدهای نوکلئیک ارزیابی کردیم. نتایج به شرح زیر است:

	DNA				HCP
	بازیابی IgG	محتوای (pg/mg IgG) توسط RT PCR		فاکتور حذف	محتوای (ng/mg IgG) توسط Elisa		فاکتور حذف
اجرا کنید	%	قبل از غشاء کیو	بعد از ممبران Q	ورود به سیستم	قبل از غشاء کیو	بعد از ممبران Q	ورود به سیستم
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

جدول 1. میزان حذف DNA و پروتئین سلول میزبان در CHO-مواد IgG بیان شده با استفاده از کروماتوگرافی غشایی SP

مجموعه‌ای از آزمایش‌ها نشان داد که کروماتوگرافی غشایی SP می‌تواند به طور موثر آلاینده‌ها را حذف کند و در عین حال نرخ بازیابی بالای IgG هدف را حفظ کند.

هنگام مقایسه کروماتوگرافی غشایی Gudiling SP با مارک های وارداتی، داده های ظرفیت اتصال به شرح زیر است:

صحافیcظرفیت (mg/ml)	سارتوریوس	رنگ پریدگی	هدایت کردن
لیزوزیم	25	32	29
تریپسین	22	27	25

جدول 2. عملکرد ظرفیت اتصال پروتئین های مختلف در محصولات ما و مارک های رقیب

ارزیابی کلی نشان می دهد که ظرفیت الزام آور ما با محصولات وارداتی قابل مقایسه است.

شکل 2. آزمایش ظرفیت اتصال ماژول کروماتوگرافی غشایی SP با استفاده از لیزوزیم به عنوان استاندارد

در مقایسه با ظرفیت اتصال پویا و محصولات وارداتی، تأیید شد که اکثر پروتئین‌های هدف را می‌توان زمانی که لیزوزیم در 190 میلی‌مولار NaCl شسته می‌شود، جذب کرد.

از طریق شرایط شستشوی مختلف، ما دریافتیم که پروفایل های شستشوی کروماتوگرافی غشایی شبیه به ژل آگارز است، اما خلوص پروتئین ها به طور قابل توجهی در غلظت های مختلف نمک متفاوت است. در تحقیق و توسعه و تولید واقعی، تعیین کمی شرایط بهینه شستشو برای به دست آوردن پروتئین‌های هدف با خلوص بالا ضروری است.

 

4 موارد کاربردی معمولی

حذف DNA، ویروس ها و پروتئین های سلول میزبان

جذب پلاسمیدها، ویروس ها، پروتئین ها و خالص سازی الیگونوکلئوتیدها

حذف رنگدانه ها از آبگوشت تخمیر مخمر و جذب پروتئین با ظرفیت بالا

 

5 روش استفاده

5.1 آماده سازی و مونتاژ تجهیزات:

5.1.1: ماژول کروماتوگرافی غشایی را بر روی یک سیستم کروماتوگرافی ÄKTA با پیروی از رویه‌های مشابه ستون‌های رزین نصب کنید، و اطمینان حاصل کنید که جهت جریان با فلش‌های ماژول و جهت ورودی مطابقت دارد. ماژول را با استفاده از قفل‌های Luer یا اتصالات سبک گیره{2}}برای ادغام ایمن در سیستم وصل کنید.

5.1.2 نرخ جریان خوراک را روی5-10 MV/minو ماژول را با استفاده از بافر تعادل گاز زدایی کنید و اطمینان حاصل کنید که پساب خروجی از حباب های هوا خالی است. پس از گاز زدایی، خروجی تراوش را به سیستم کروماتوگرافی وصل کنید.

5.2: درمان پیش از-استفاده:

5.2.1:

نرخ جریان خوراک را روی5-10 MV/minو پیش{0}درمان را با0.5 مولار NaOH برای بیش از 5 MV، حصول اطمینان از رسیدن غشاء به تعادل کامل.

5.2.2: با سرعت جریان یکسان، پیش-درمان را با1 مولار NaCl برای بیش از 5 MVتا اطمینان حاصل شود که غشا به تعادل کامل می رسد.

5.3 فرآیند کروماتوگرافی

5.3.1 سرعت جریان خوراک را روی 5-10 MV/min تنظیم کنید و غشا را با بافر تعادل برای بیش از 5 MV متعادل کنید تا غشا به تعادل کامل برسد.

5.3.2 پس از 0.22 میکرومتر قبل از فیلتر کردن، نمونه را تا زمانی که بارگیری نمونه کامل شود یا ظرفیت اتصال کروماتوگرافی به دست آید، روی غشا بارگذاری کنید.

5.3.3 شستشو با بافر تعادل برای بیش از 10 MV تا زمانی که سیگنال UV به خط پایه بازگردد.

5.3.4 شستشوی گرادیان یا شستشوی گام به گام را با توجه به طراحی فرآیند اعمال کنید و کسرها را در صورت نیاز جمع آوری کنید.

5.4 پست CIP{1}}استفاده از درمان - دستگاه کروماتوگرافی غشایی CIP (تمیز کردن در محل)

5.4.1 نرخ جریان خوراک را روی 5-10 MV/min تنظیم کنید و تمیز کردن را با 1 M NaOH برای بیش از 10 MV انجام دهید، تا زمانی که سیگنال UV به زیر خط پایه کاهش یابد.

5.4.2 پس از گردش به مدت 30 دقیقه، به شستشو با آب بروید تا PH به 7-8 برسد، سپس تمیز کردن را با اتانول 20 درصد ادامه دهید تا رسانایی تقریباً ثابت شود.

5.5 ذخیره سازی کروماتوگرافی غشایی

پس از استفاده و تکمیل CIP، ماژول غشاء را می توان با خیساندن در اتانول 20 درصد جدا کرد و ذخیره کرد، یا می توان آن را در{1} خط در دمای اتاق در محلولی حاوی اتانول 20 درصد ذخیره کرد. محلول اتانول 20 درصد باید به طور دوره ای بررسی و جایگزین شود.

 

6. اطلاعات سفارش

فیلتر کپسول کروماتوگرافی غشایی تبادل آنیون Q Strong

	مقیاس آزمایشگاهی	مقیاس کوچک	مقیاس آزمایشی	مقیاس تولید
مدل محصول	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
حجم غشاء	0.2 میلی لیتر	5 میلی لیتر	400 میلی لیتر	5L

تگ های محبوب: سانتی متر کروماتوگرافی غشایی تبادل یون ضعیف، چین، تامین کنندگان، تولید کنندگان، کارخانه، عمده فروشی، عمده، در انبار، نمونه رایگان