پاسخ به سوالات حرفه ای لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون

1. مواد غشایی لوله اولترافیلتراسیون چیست؟

غشای پلی اتر سولفون دارای وزن مولکولی شفاف و دقیق، خواص فیزیکی و شیمیایی پایدار، جذب پروتئین بسیار کم و بازیابی محصول بالا است.

2. اگر پروتئین هایی با وزن مولکولی متفاوت باید جدا شوند، وزن مولکولی پروتئین ها چقدر تفاوت دارد؟

اندازه دو پروتئین باید 10 برابر یا بیشتر باشد

3. آیا می توان از لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون برای غلظت ویروس استفاده کرد؟

لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون می تواند ویروس را چندین بار یا حتی بارها متمرکز کند. ما یک غشای ویژه برای ویروس داریم. ویروس های مختلف باید اندازه منافذ غشایی مناسب را انتخاب کنند

4. آیا لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون می تواند ضد عفونی و مقاوم در برابر قلیایی باشد؟

می توان آن را با محلول آبی اتانول 75 درصد ضد عفونی کرد. مواد ما می تواند در برابر شستشوی قلیایی 0.1-0.5n هیدروکسید سدیم مقاومت کند

5. آیا می توان از لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون برای استریل کردن فشار بالا استفاده کرد

ما یک لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون ویژه داریم که برای عقیم سازی{0}فشار بالا مناسب است.

6. با توجه به پایداری پروتئین، آیا می توان لوله اولترافیلتراسیون را در دمای پایین سانتریفیوژ کرد؟

بله، مواد ما در برابر دمای پایین مقاوم است، اما زمان غلظت طولانی تر خواهد بود. سرعت فیلتراسیون غشا به دمای مایع خوراک مربوط می شود

7. در مورد میزان بهبودی

به طور کلی، نرخ بازیابی املاح با غلظت بیشتر از 0.1mg/ml 90 درصد یا بیشتر است. به طور کلی، از دست دادن نمونه ها به دلیل جذب غیر اختصاصی روی سطح غشای فیلتر و سطح لوله مواد ایجاد می شود. به منظور به دست آوردن نرخ بازیابی بالا، وزن مولکولی حفظ شده غشای فیلتر انتخاب شده حدود 1/3 پروتئین مورد نظر است، غشای اولترافیلتراسیون یک غشای نامتقارن است، اندازه منافذ آن به طور معمول توزیع شده است و ممکن است تحت فشار گریز از مرکز نشت کند. فشار. در این شرایط، مایع پروتئینی ممکن است تغییر شکل دهد، بنابراین، هرچه دیافراگم رهگیری کوچکتر باشد، سرعت جریان کندتر است، اما سرعت بازیابی بیشتر خواهد بود.

8. هنگامی که پروتئین غلیظ می شود، بارش وجود دارد. باید باهاش ​​چکار کنم؟

اگر پروتئین خیلی سریع یا بیش از حد متمرکز شود، ممکن است باعث رسوب پروتئین شود. غلظت نهایی پس از غلظت پروتئین نباید خیلی زیاد باشد. برای پروتئین هایی که به سرعت غلظت حساس هستند و به راحتی رسوب می کنند، روش های بهبود پیشنهادی به شرح زیر است:

1) سرعت گریز از مرکز را کاهش دهید،

2) از غشای اولترافیلتراسیون با وزن مولکولی بیشتر استفاده کنید

3) لوله تغلیظ را باد و مکیده و سپس سانتریفیوژ کنید

9. دلایل احتمالی که چرا لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون را نمی توان سانتریفیوژ کرد چیست؟

اگر لوله اولترافیلتراسیون را نمی توان سانتریفیوژ کرد، سانتریفیوژ اولیه را می توان با محلول آبی اتانول 20 درصد انجام داد، زیرا پس از خشک شدن کامل غشای اولترافیلتراسیون، سطح غشاء ضعیف آبگریز است و می توان شار را پس از خیساندن با سطح کم بازیابی کرد. حلال کششی

10. استفاده صحیح و حفظ لوله اولترافیلتراسیون

لوله اولترافیلتراسیون ابتدا باید قبل از استفاده با آب تصفیه شده سانتریفیوژ شود تا یکپارچگی آن تایید شود. پس از هر بار استفاده، لازم است آن را در حالت مرطوب نگهداری کنید تا از خشک شدن غشا جلوگیری شود

11. چگونه اندوتوکسین را از لوله اولترافیلتراسیون خارج کنیم؟

لوله اولترافیلتراسیون ارائه شده توسط ما با اندوتوکسین درمان نشده است. در عین حال، به دلیل وجود گسترده اندوتوکسین ها در طبیعت، نمونه هایی که به سموم داخلی نیاز دارند، می توانند قبل از آزمایش با هیدروکسید سدیم 0.5N از قبل تمیز شوند و سپس با آب RO تمیز شوند تا قسمت اعظم اندوتوکسین حذف شود.

12. هنگامی که پروتئین غلیظ در پایین دست تجزیه و تحلیل می شود، مشخص می شود که تداخلی وجود دارد. دلیل ش چیه؟

لوله اولترافیلتراسیون را می توان با بافر یا آب تصفیه شده از قبل تمیز کرد. اگر تداخل همچنان وجود دارد، آن را با 0.1N هیدروکسید سدیم تمیز کنید و سپس آن را با آب تصفیه شده تمیز کنید.

13. ممکن است جذب غیر اختصاصی بین پروتئین هدف و غشای اولترافیلتراسیون در فرآیند تغلیظ وجود داشته باشد. چگونه آن را بهبود بخشیم؟

ما از غشای پلی اتر سولفون آبدوست استفاده می کنیم، اما برای برخی از پروتئین ها با خواص ویژه، جذب غیر اختصاصی آنها با غشاء ممکن است افزایش یابد. در این صورت، می‌توانیم قبل از آزمایش، لوله اولترافیلتراسیون را پیش تصفیه کنیم یا با مهندس خود تماس بگیریم

14. پس از تغلیظ مشخص می شود که پروتئین هدفی در کنسانتره وجود ندارد. دلایل احتمالی چیست؟

1) غلظت اولیه پروتئین نباید خیلی کم باشد. اگر غلظت خیلی کم باشد، ممکن است غشا حفظ نشود

2) اندازه منافذ غشا مناسب را انتخاب کنید. سانتریفیوژ و غلظت لوله اولترافیلتراسیون متعلق به فیلتراسیون بن بست است. اندازه منافذ غشا معمولاً کمتر از 2 برابر یا بیشتر از پروتئین هدف است

3) سرعت گریز از مرکز مناسب را انتخاب کنید

4) آیا پروتئین هدف رسوب می کند یا خیر